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  • 标题:新種の好アルカリ性 Bacillus が生産するアルカリマンナナーゼ
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  • 作者:武田 信博 ; 平澤 一道 ; 内村 康祐
  • 期刊名称:Journal of Applied Glycoscience
  • 印刷版ISSN:1344-7882
  • 电子版ISSN:1880-7291
  • 出版年度:2004
  • 卷号:51
  • 期号:3
  • 页码:229-236
  • DOI:10.5458/jag.51.229
  • 出版社:The Japanese Society of Applied Glycoscience
  • 摘要:

    土壌サンプルから分離した新種の Bacillus sp. JAMB-602株(Fig. 1)由来の新規アルカリマンナナーゼ遺伝子を単離し,その配列を決定した.本酵素遺伝子は490アミノ酸(53,763 Da)のタンパク質をコードしており(Fig. 2),推定アミノ酸配列は公知の中性マンナナーゼ(glycoside hydrolase family 5)と32-58%の相同性を示した.本酵素の成熟タンパク質を枯草菌を宿主として菌体外に大量発現させることに成功し,その生産量は2 g/Lであった(Table 1).本組換え酵素(約50 kDa,Fig. 3)を完全精製したところ,最適pHは9(Fig. 4),最適温度は65°C,55°Cにおける半減期は2時間であった(Fig. 5).本酵素は N -bromosuccinimideによって失活した.マンナンの加水分解様式から判断して,本酵素はエンド型のマンナナーゼであることが判明した(Fig. 6).

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