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  • 标题:グリコーゲンの in vitro における新しい合成方法の開発,および得られたグリコーゲンの性質
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  • 作者:梶浦 英樹 ; 高田 洋樹 ; 空山 恒久
  • 期刊名称:Journal of Applied Glycoscience
  • 印刷版ISSN:1344-7882
  • 电子版ISSN:1880-7291
  • 出版年度:2010
  • 卷号:57
  • 期号:2
  • 页码:105-111
  • DOI:10.5458/jag.57.105
  • 出版社:The Japanese Society of Applied Glycoscience
  • 摘要:

    酵素を用いたグリコーゲンの新しい合成方法を開発した.この方法では,ブランチングエンザイム(BE, EC 2.4.1.18)の基質として短鎖アミロースを使用する.得られた酵素合成グリコーゲン(enzymatically synthesized glycogen, ESG)の分子量は,BEの種類,基質であるアミロースの分子量,基質濃度に依存した.植物由来BEと Bacillus cereus 由来BEはこの方法で高分子グルカンを合成することができなかったが,他の6種類の細菌由来BEはESGを合成することができた.特に Aquifex aeolicus 由来のBEが分子量3000 kDaから30,000 kDaの大きさのESGを合成するのに最も適していた.さらにアミロマルターゼ(AM, EC 2.4.1.25)を反応系に加えることにより収率が大幅に上昇し,最大約65%まで達した.この方法で得られたESGの構造を分析したところ,平均単位鎖長は8.2-11.6,内部平均鎖長は2.0-3.3,外部平均鎖長は4.2-7.6であった.透過型電子顕微鏡による観察および固有粘度の分析によって,ESG分子が球形であることが示された.また,ESGは,澱粉と違ってプルラナーゼでほとんど分解されなかった.ESGの水溶液の色は,オパール色(青みがかった乳白色)であり,ヨウ素によって赤茶色に呈色した.これらの分析結果からESGと天然物由来のグリコーゲン(natural source glycogen, NSG)がほぼ同じ分子形状,溶液物性をもつことがわかった.

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