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文章基本信息

  • 标题:α-1,6およびα-1,4-グルコシド結合に加水分解活性を有するイソマルトデキストラナーゼの活性部位の検討
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  • 作者:高柳 勉 ; 木村 淳夫 ; 松井 博和
  • 期刊名称:Journal of Applied Glycoscience
  • 印刷版ISSN:1344-7882
  • 电子版ISSN:1880-7291
  • 出版年度:2001
  • 卷号:48
  • 期号:1
  • 页码:55-61
  • DOI:10.5458/jag.48.55
  • 出版社:The Japanese Society of Applied Glycoscience
  • 摘要:

    Arthrobacter globiformisT6由来のイソマルトデキストラナーゼの示すα-1,6およびα-1,4-グルコシド結合加水分解反応を酵素反応速度論的に解析した.本酵素は,イソマルトトリオースのα-1,6-グルコシド結合およびパノースα-1,4-グルコシド結合を加水分解し,イソマルトースとグルコースを生成した.イソマルトトリオースとパノースから成る混合基質に本酵素を作用させたところ,Lineweaver-Burkプロットは直線性を示し,その反応速度は各基質単独の場合の反応速度の和よりも小さく,両基質問に拮抗が認められた.さらに,各モル比の混合基質における見かけの最大反応速度は単一活性部位の理論式から得られる値と一致した.これらの結果は,α-1,6およびα-1,4-グルコシド結合の加水分解に関与する本酵素の活性部位が同一であることを示している.本酵素はイソマルトデキストラナーゼ活性と同時にプルランをエンド型で加水分解してイソバノースを生成するイソプルラナーゼ活性を示す.本酵素の遺伝子をE.coliで発現させた酵素タンパク質もイソプルラナーゼの活性を示し,単一酵素タンパク質がデキストラナーゼとイソプルラナーゼの両酵素活性を有していることが遺伝子工学的手法により確認された.

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