文章基本信息
- 标题：耐熱性とキレート剤耐性を獲得したBacillus由来のα-アミラーゼ変異体
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- 作者：伊藤 進 ; 秦田 勇二 ; 小澤 忠弘 等
- 期刊名称：Journal of Applied Glycoscience
- 印刷版ISSN：1344-7882
- 电子版ISSN：1880-7291
- 出版年度：2002
- 卷号：49
- 期号：3
- 页码：257-264
- DOI：10.5458/jag.49.257
- 出版社：The Japanese Society of Applied Glycoscience
- 摘要：
好アルカリ性Bacillus sp.KSM-1378株由来の液化型アルカリα-アミラーゼ(AmyK)のドメインBのループに存在するArg181-Gly182とThr183-Gly184をタンパク質工学的に除去し,得られた変異酵素の耐熱性とキレート剤耐性を調べた.Bacillus stearothermophilus由来のα-アミラーゼ(BSA)の立体構造では,Ilel81-Glyl82(AmyKのThrl83-Gly184に相当)の存在がCa2+とAsp207の配位を妨げているので,Arg179-Gly180よりIle181-Glyl82を除去した方がα-アミラーゼの耐熱性が増大すると予想されている.然しながら,AmyKのArgl81-Gly182とThr183-Gly184を除去した変異体のEDTA耐性は同程度に向上していた.更に,Thr183-Glyl84欠損変異体に比べ,Arg181-Gly182欠損変異体の耐熱性の方が明らかに高いことが判明した.従って,AmyKの耐熱性に係わる微細構造はBSAと異なっていることが示唆された.
