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  • 标题:食品中の志賀毒素産生性大腸菌O157迅速検査法としての5'-Nuclease PCR法の評価
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  • 作者:大塚 佳代子 ; 土井 りえ ; 斎藤 章暢
  • 期刊名称:日本食品微生物学会雑誌
  • 印刷版ISSN:1340-8267
  • 电子版ISSN:1882-5982
  • 出版年度:2003
  • 卷号:20
  • 期号:2
  • 页码:69-74
  • DOI:10.5803/jsfm.20.69
  • 出版社:Japanese Society of Food Microbiology
  • 摘要:

    食品に存在する E.coli O157の5'-Nuclease (TaqMan) PCRによる迅速検出法を培養法, standard PCR法およびELISA法と比較検討し, 以下の結果を得た. 1.TaqMan E. coli O157:H7キット, TaqMan E.coli STX1キットおよびTaqMan E.coli STX2キットによる E.coli O157の検出は, 食品培養液1ml当たり102以上cfu (PCR反応当たり2~20cfu) で可能であった.しかし, Standard PCRの検出感度はTaqManPCRに比べ低く, 培養法は食品の種類により感度が異なった.また, ELISA法は C.freundii と非特異的反応を示し, 特異性, 感度ともにTaqMan PCRに比ベ劣った. 2. TaqMan E.coli O157: H7キットによるTaqManPCRは, EPEC O55:H7に交差反応を示したことから, 標的遺伝子部位の異なる複数のTaqMan Detectionキットを用いて, E.coli O157検索を行う必要がある. 3. TaqMan PCRは, 食品の増菌培養に続く菌の分離操作が不要なため, 反応開始後3時間以内に結果が得られ, E.coli O157検査の迅速化が図られる. 4.TaqManPCRで算出された E.coli O157菌数とCt値間に相関係数ほぼ1の関係が認められ, 食品に付着する E.coli O157菌量を定量的に推定しうることが示唆された.

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