摘要：مقدمه: بتا دفنسین 126 (DEFB 126) انسانی یک گلیکوپروتئین کوچک کاتیونی است که به‌عنوان جزء مهمی از گلیکوکالیکس اسپرم پریمات‌ها و انسان مطرح مي‌شود. این پروتئین از اسپرم در مقابل میکروب‌های عفونت‌زا و سیستم ایمنی زنان محافظت مي‌کند. ژن DEFB126 در انسان روی انتهای تلومری بازوی کوتاه کروموزوم 20 قرار دارد. یک تغییر ژنتیکی در چارچوب خوانش این ژن که در اثر حذف دو سیتوزین به‌وجود مي‌آید، عملکرد اسپرم را تحت تأثير قرار مي‌دهد. لذا این مطالعه با هدف تعیین ارتباط این جهش با میزان موفقیت در تزریق داخل رحمی اسپرم (IUI) انجام گرفت.مواد و روش‌ها: در اين مطالعه میزان جهش ژن DEFB126 در 76 مرد ایرانی با دلایل نامشخص ناباروری که زنان آنها نتایج مثبت یا منفی IUI داشتند مشخص گرديد. پس از استخراج DNA از خون بیماران مورد مطالعه، کیفیت DNA استخراج شده توسط دستگاه اسپکتروفوتومتر مورد ارزیابی قرار گرفت. روش‌های (PCR-SSCP) و Sequencing نيز برای تأيید نتایج استفاده شدند. علاوه بر این از تكنيك ایمونوسیتوشیمی برای بررسی میزان بيان این پروتئین در سطح سلول‌های اسپرم استفاده گرديد.نتايج: نتایج بررسي DNA نشان داد که 4/24 درصد از مردانی که نتایج باروری همسرانشان منفی شده بود دارای جهش مي‌باشند، در‌حالی که افرادی که نتایج باروری آنها مثبت شده بود فاقد این جهش بودند. همچنین پروتئین کمتری بر سطح اسپرم مردان دارای آلل جهش‌دار مشاهده شد.نتيجه‌گيري: نتايج مطالعه حاضر نشان مي‌دهد که داشتن آلل هموزیگوت جهش‌دار در توالی بتا دفنسین 126 عامل مؤثری در عدم موفقیت درمان از طریق IUI مي‌باشد.
其他摘要：Introduction: Human β-defensin 126 (DEFB126) is a small cationic glycoprotein that is considered as an important component of the primates and human sperm glycocalix. It protects sperm from infection-causing microbes and against the female immune system antibodies. Human DEFB126 gene is located on the sub-telomeric region of 20p13. DEFB126 variations caused by a frame shift deletion of two cytosines was found to affect the sperms functionality. The aim of this study was to verify the correlation of this gene mutation with success rate of IUI.Methods: In the present study, the rate of DEFB126 gene mutation was elucidated in 76 Iranian men with unexplained infertility whose wives had undergone IUI with either positive or negative results. DNA properties quantified with NanoDrop spectrophotometers. Standard PCR, Single-strand conformation polymorphism (SSCP) and sequencing were used to confirm the results. Moreover,immunocytochemistry was performed for the assessment of the protein expression on sperm cells.Results: DNA quantification revealed that 24.4% of men, whose wives showed a negative result for IUI, were homozygote for this mutation, whereas none of the couples with a positive IUI result carried the mutation for this gene (P≤0.05). Moreover, the amount of this protein was decreased on the sperms of men who carried the mutant allele.Conclusion: Results of the present study suggested that common alteration in DEFB126 gene could be considered as a critical factor in the success rate of IUI operation.
