文章基本信息
- 标题：Cloning and Expression of an Alkalophilic Bacillus Oligo-1, 6-Glucosidase Gene in Escherichia coli
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- 作者：Mikio YAMAMOTO ; Koki HORIKOSHI
- 期刊名称：Journal of Applied Glycoscience
- 印刷版ISSN：1344-7882
- 电子版ISSN：1880-7291
- 出版年度：1987
- 卷号：34
- 期号：4
- 页码：300-303
- DOI：10.5458/jag1972.34.300
- 语种：English
- 出版社：The Japanese Society of Applied Glycoscience
- 摘要：
Alkalophilic Bacillus sp. No. F5の染色体DNAを Eco RVで切断し, プラスミドpBR322の Eco RVサイトに連結し, E. coli HB101に形質転換を試み, α-グルコシダーゼ活性を有する株を選択した. この株は, pBR322に9.1Kbの断片が挿入されたプラスミド (pMC1) を保持していた. 本挿入断片は, サザンハイブリダイゼーションにより, 5F株由来であることが確認された. サブクローニングの結果, 3.1Kbの Eco RV- Pvu II断片がオリゴ-1,6-グルコシダーゼの発現に必須であった. 3.1Kbの挿入断片 ( Eco RV- Pvu II断片) をもつプラスミドpMC21を保持する E. coli HB101は, F5株の13倍の酵素を生成し, その生成酵素の至適pHおよび至適温度はpH 6.0-6.5, 45℃で, F5株のオリゴ-1,6-グルコシダーゼと同じであった.
