摘要：En este trabajo se presentan los resultados preliminares para el desarrollo de un biosensor amperométrico destinado a la cuantificación de Proteína B Específica de la Preñez (PSPB) en fluidos biológicos como medio de diagnóstico clínico precoz de la preñez bovina. A la superficie de oro modificada con ácido mercaptoundecanoico (MUA) se fijaron anticuerpos anti-PSPB y peroxidasa de rábano (HRP). Se verificó la inmovilización de las biomoléculas mediante voltamperometría cíclica y medida del ángulo de contacto.Se estudió el comportamiento electroquímico del electrodo desarrollado por medio de voltamperometría cíclica y medidas a potencial constante, estableciendo la relación entre el cambio de corriente catódica (al potencial de reducción de la quinona) y la concentración de PSPB. Esta relación se ve afectada por la formación de complejos antígeno – anticuerpo que limitan el acceso del sustrato al sitio activo de la enzima, provocando una disminución en la señal eléctrica.El electrodo modificado de oro - anti-PSPB – HRP respondió de forma inversamente proporcional a la concentración de PSPB a un potencial de -200 mV (contra electrodo de referencia Ag/AgCl), tanto por voltamperometría cíclica como a potencial constante, y por tanto podría ser la base para el desarrollo de un biosensor amperométrico para detectar precozmente la preñez bovina.
其他摘要：Due to big importance of early clinical diagnosis of pregnancy in cattle, the aim of this work was the development of an ampero- metric biosensor which enables protein quantification of pregnancy specific protein B in biological fluids. To achieve this goal Mercato Undecanoic Acid was immobilized on the gold surface, with anti-PSPB and Horseradish Peroxidase. The immobiliza- tion was verified by electrochemical and non electrochemical methods, such as cyclic voltammetry and contact angle measure-ments respectively.The electrochemical performance of the electrode was studied by cyclic voltammetry and constant potential amperometry, to establish the relationship between the change in cathode current (the quinone reduction potential) and the concentration of PSPB. Due to the formation of large antigen antibody complexes which limit the access of the enzyme’s specific substrate to its active site, the cathodic current would decrease as was observed.The developed gold - anti-PSPB - HRP electrode showed a lineal dependence on the concentration of PSPB at potential of -200 mV (vs Ag/AgCl), both by cyclic voltammetry and constant potential amperometry. Therefore this study could be use for the design of an amperometric biosensor which allows the detection of bovine pregnancy at the earlier stages.
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