摘要：O uso de marcadores moleculares tem crescido exponencialmente nos últimos anos,
principalmente em estudos de genética de populações de plantas, quando se trata da
conservação de espécies importantes ou que estão inseridas em biomas que precisam ser
preservados. A exemplo disso, temos a cultura do feijão (Phaseolus vulgaris) cultivado no
bioma Cerrado, sendo exposto a diferentes tipos de solos, climas e patógenos. Dentre os
patógenos radiculares, os nematoides de galha se destacam, sendo considerados pragas
do feijoeiro. Diante disso, o objetivo é desenvolver e caracterizar marcadores
microssatélites que confiram resistência ao nematoide Meloidogyne spp. em feijão comum.
Para isso, sequências de QTLs foram selecionadas no banco de dados NCBI, por
apresentarem genes homólogos aos da soja por possuírem resistência ao patógeno em
questão, sendo identificadas para o feijão, usando o programa “BLAST” no site Phytozome.
Nove primers foram desenhados utilizando o programa Primer3. Foi feita a extração de
DNA de sementes de feijão comum, utilizando protocolo de extração pelo método SDS
10%. A quantificação foi feita em eletroforese em gel de agarose a 0,8%, corado com
brometo de etídeo (0,5%/ml) em solução tampão (TBE) 1x. Para amplificação e
otimização por PCR, o DNA de um único genótipo foi usado, utilizando termociclador. As
PCRs funcionais foram submetidas à eletroforese vertical em géis de poliacrilamida (4%)
e corados com nitrato de prata. As temperaturas de anelamento (TA) dos primers que
apresentaram produto de PCR específicos foram de 52,5º, 55º e 59º, mostrando
especificidade nas bandas, confirmando que há regiões alvos de resistência.
关键词：Marcadores de DNA;Seleção assistida;Resistência genética
