标题：Перспективный подход к оценке качества вакцины чумной живой по показателю иммуногенности
其他标题：Perspectives approach to the assessment of the quality of the vaccine plague live in terms of immunogenicity. Epidemiology and Vaccinal Prevention
摘要：Цель исследования – изучение возможности применения антиген-стимулированных клеточных тестов in vitro и технологии цитометрического анализа для контроля иммуногенной активности производственных серий вакцины чумной живой. Материалы и методы. В качестве биомоделей использовали белых лабораторных мышей, иммунизированных коммерческим препаратом вакцины чумной живой из штамма Yersinia pestis EV линии НИИЭГ в дозах – 8 х 102, 4 х 103, 2 х 104 и 1 х 105 живых микробных клеток. Кровь для исследования брали у интактных мышей и на 7, 14 и 21 сут после иммунизации. Интенсивность антигенреактивности лимфоцитов определяли в клеточных тестах in vitro, анализируя маркер ранней активации (CD45 CD3 CD25 ) лимфоцитов с использованием конъюгированных с флуорохромами моноклональных антител. В качестве специфического антигена использовали комплекс водорастворимых антигенов чумного микроба. Результаты и обсуждение. В результате исследования показано, что у животных, вакцинированных дозами 4 х 103 –1 х 105 живых микробных клеток, наивысший уровень экспрессии лимфоцитами маркера активации при антигенной стимуляции in vitro регистрируется на 14 сут после иммунизации, при этом количество CD25-позитивных лимфоцитов в среднем в 6,8 раз выше, чем в контрольной группе. Установлена высокая степень прямой связи (коэффициент корреляции r = 1,000) количества выживших животных с увеличением уровня лимфоцитов, экспрессирующих маркеры ранней активации – CD25. Предлагаемая методика может быть использована в качестве дополнительного теста при изучении степени иммуногенности новых (кандидатных) вакцин против чумы.
其他摘要：Research objective – studying of a possibility of application antigen – stimulated cellular in vitro tests and technology of the cytometric analysis for control of immunogene activity of batches of vaccine plague live. Materials and methods. As biomodels used white laboratory mice, immunized commercial medicine of vaccine of the plague NIIEG line, live from a strain of Yersinia pestis EV, in doses – 8 х 102, 4 х 103, 2 х 104 and 1 х 105 of living microbic cells. Blood for a research was taken from intact mice and on 7, 14 and 21 days after immunization. The intensity of an antigenreaktivnost of lymphocytes was defined in cellular in vitro tests, analyzing a marker of early activation (CD45 CD3 CD25 ) of lymphocytes with use of the monoclonal antibodies conjugated from fluorokhroma. As specific antigen used a complex of water-soluble antigens of a plague microbe. Results. As a result of a research it is shown that at the animals vaccinated by doses 4 х 103 – 1 х 105 living microbic cells, the highest level of an expression activation marker lymphocytes at anti-gene stimulation of in vitro is registered on 14 days after immunization, at the same time the quantity of CD25 – positive lymphocytes are on average 6.8 times higher, than in control group. High degree of direct link (coefficient of correlation of r = 1,000) quantities of the survived animals with increase in level of lymphocytes, expressiruyushchy markers of early activation – CD25 is established. Conclusions. The offered technique can be used as the additional test when studying degree of immunogenicity of new (kandidatny) vaccines against plague.
其他关键词：immunogenicity;immunity against plague;flowing tsitofluorimetriya;marker of activation of lymphocytes;complex of watersoluble antigens Yersinia pestis;white mice
