出版社:Centro Provincial de Información de Ciencias Médicas de Camagüey
摘要:Se evaluó la utilidad de la técnica de electroelusión en la obtención del antígeno específico prostático con actividad biológica para su empleo en sistemas basados en el reconocimiento antígeno-anticuerpo (ELISA, RIA, SUMA). Para la muestra se partió del semen de pacientes voluntarios, precipitados con sulfato de amonio al 70 %. Las corridas electroforéticas en geles de poliacrilamida no reducidos se llevaron a cabo a 4º C. Se procedió a electroeluir el fragmento de acrilamida cortado en la talla deseada (33 KDa) y para ello se utilizaron marcadores adecuados de peso molecular. La metodología empleada permitió obtener un antígeno con un grado de pureza próximo al 70 %. El método de electroelusión constituye un procedimiento rápido y poco costoso para su uso en laboratorios con bajos recursos. Los resultados aquí obtenidos no mostraron diferencias significativas (p=0.181) con el PSA purificado por el método cromatográfico, lo que sugiere su uso en obtención del antígeno específico prostático y otras moléculas para tales fines.
其他摘要:This paper deals with the usefulness of electroelusión in yielding prostatic specific antigen with biologic activity, intended to be used in systems based on antigen antibody recognition (ELISA, RIA, and SUMA). The sample was chosen from patients who volunteered to donate their semen, which was precipitated in 70 % ammonium sulphate. Electrophoretic runs in non reduced polyacrilamide gels took place at 4 o C. The acrilamide fragment, once it was cut at the size desired (33KDa), was electoeluded. To do so, markers of adegnate molecular weight were used. The methodology followed allowed for the obtainment of an antigen with a purity level that nears 70 %. Electroelution is a fast and uncouthly procedure that fits poorly equipped laboratories. Results so achieved were not significantly different from those derived from chromatographypurified PSA, which suggests that electroelution is viable in obtaining PSA and other molecules to such an end.
关键词:ELECTROFORESIS EN GEL DE POLIACRILAMIDA; ENSAYO DE CAMBIO DE MOVILIDAD ELECTROFORÉTICA; ANTÍGENO PROSTÁTICO ESPECÍFICO/ aislamiento/purificación; NEOPLASMAS DE LA PRÓSTATA;ELECTROPHORESIS POLYACRYLAMIDE GEL; ELECTROPHORETIC MOBILITY SHIFT ASSAY; PROSTATE SPECIFIC ANTIGEN /isolation/purification; PROSTATIC NEOPLASMS