摘要：Los derivados 5-nitroimidazólicos constituyen un grupo bien caracterizado de agentes antibacterianos muy utilizados en la terapéutica humana. Estos agentes inhiben el crecimiento de bacterias aerobias y anaerobias y algunos protozoos tales como Trichomonas vaginalis, Entamoeba histolytica y Giardia lamblia. En el presente trabajo se presentan los resultados correspondientes a una evaluación de la actividad genotóxica potencial, mediante ensayos citogenéticos, de tres derivados Metronidazol (MTZ), Ornidazol (ONZ) y Tinidazol (TNZ), en sus dosis de uso terapéutico, para contribuir con la evaluación de riesgo de su consumo. Los estudios se llevaron a cabo en cultivo de linfocitos humanos de sangre periférica, utilizando 4 concentraciones diferentes 0,1, 1, 10 y 50 ug/ml, utilizando como biomarcadores de efecto el Indice Mitótico (IM), la Cinética de Proliferación Celular expresado como Índice de Replicación (IR), el Intercambio de Cromátides Hermanas (ICH) y la frecuencia de Aberraciones Cromosómicas (AC). Los resultados muestran una disminución significativa en el IM (p<0,001), así como un incremento en la frecuencia de ICH (p<0.001) y AC (p<0,001). No se encontraron modificaciones en el IR. Estos resultados muestran un efecto cito y genotóxico para los tres derivados, relacionados con procesos de muerte celular. Para corroborar esta hipótesis se realizaron estudios de fragmentación del ADN (laddering), microscopía de fluorescencia mediante tinción con Naranja de Acridina/ Bromuro de Etidio y citometría de flujo con Ioduro de Propidio. Se puede concluir que estos derivados modulan la muerte celular mediante mecanismos apoptóticos en las condiciones de ensayo utilizadas.
其他摘要：5-nitroimidazoles are a well-established group of antiprotozoal and antibacterial agents. Thanks to their antimicrobial activity these chemotherapeutic agents inhibit the growth of both: anaerobic bacteria and certain anaerobic protozoa, such as Trichomonas vaginalis, Entamoeba histolytica and Giardia lamblia. The aim of the present study is to achieve a precise characterization of the genotoxic activity of these compounds and to establish the value of cytogenetic assays in order to determine the effect of these drugs, at therapeutic doses, to settle an improved risk assessment. Three nitroimidazole were studied, Metronidazole, Ornidazoleand Tinidazole, at four different concentrations (0.1, 1, 10 and 50 µg/ml of peripheral blood lymphocyte culture). Endpoints analyzed included: Mitotic Index (MI), Replication Index (RI), Sister Chromatid Exchange (SCE) and Chromosomal Aberrations (CA). An analysis of variance test (ANOVA) was performed to evaluate the results. A significant decrease (p<0.001) in MI as well as an increase in SCE (p<0.001) and CA (0.001) frequencies for the three drugs was observed. No modifications in RI were found. The results suggest a genotoxic and cytotoxic effect of MTZ, ONZ and TNZ related with cell death process. Therefore we decided to evaluate this mechanism by DNA fragmentation (laddering), fluorescence microscopy using the acridine orange/ethidium bromide staining and flow cytometry (Propidium Iodide). We conclude that these drugs are able to modulate cell death by apoptotic mechanisms in the experimental design employed.
关键词：Genotoxicidad; nitroimidazoles; muerte celular; biomarcadores;Genotoxicity; nitroimidazole; cell death; biomarkers
