Con el objetivo de determinar los niveles de IgA en las secreciones, los autores se propusieron obtener anticuerpos monoclonales (AcMs) contra esta inmunoglobulina y demostrar su posible utilización en el desarrollo de métodos de cuantificación. Se obtuvieron 6 AcM, 1 contra el componente secretor (CS) y 5 contra cadena pesada (CP) de la inmunoglobulina A (IgA) humana. Se utilizó como inmunógeno IgA purificada a partir de calostro humano. A 2 AcMs, uno contra CS y otro contra CP se les determinó el isotipo de inmunoglobulina (IgG2a e IgG1, respectivamente), se les realizó electroforesis en gel de poliacrilamida en presencia de duodecilsulfato de sodio y b-mercaptoetanol, e inmunotransferencia para la determinación de su especificidad. Se detectó IgA secretora en muestras de saliva comparando el AcM anti-CS obtenido en el laboratorio del Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kourí" (IPK) con uno comercial (Sigma Chemical Co.) y se obtuvo similitud de comportamiento. El AcM contra CS (IPK) se utilizó para detectar IgA específica a LPS ogawa en personas vacunadas con una cepa atenuada de Vibrio cholerae y se encontraron diferencias evidentes entre los niveles antes y después de la inmunización. El AcM anti-CP fue utilizado para la confección de un sistema simulado, tipo ELISA. El límite de detectabilidad fue de 9,89 ng/mL.
In order to determine the IgA levels in secretions, the authors engaged themselves to obtain monoclonal antibodies against this immunoglobulin and to show their possible utilization in the development of quantitation methods. 6 monoclonal antibodies were obtained: one against the secretoy component (SC) and five against the heavy-chain (HC) of IgA. IgA purified from human colostrum was used as immunogen (HC). The immunoglobulin isotypes (IgG2a and IgG1) were determined in 2 monoclonal antibodies, one against SC and the other against HC. Polyacrylamide gel electrophoresis was performed in the presence of sodium dodecyl sulphate and b-mercapto-ethanol. Immunotrasnference was also carried out to determine their specificity. Secretory IgA was detected in saliva specimens. The anti-SC monoclonal antibody obtained in the laboratory of the "Pedro Kourí" Institiute of Tropical Medicine (IPK) was compared with a commercial one (Sigma Chemical Co.), and a similar behaviour was observed. The monoclonal antibody against SC (IPK) was used to detect IgA specific to LPS ogawa in persons vaccinated with an attenuated strain of Vibrio cholerae. Marked differences were found between the levels before and after immunization. The anti-HC monoclonal antibody was utilized to make an ELISA-like simulated system. The detection limit was 9.89 ng/mL.